原代（神经）细胞培养概述

·原代神经元培养优缺点

即符合真实体内生理反应情况又具有体外应响因素可控单纯的优点

原代神经元培养取材不易培养成本高且细胞无法大量增殖

·原代神经元培养过程

动物牺牲并取脑

针对大脑皮质or 海马回进行分离并去除血管及脑膜

将组织进行解离形成单细胞悬液

按实验需求铺板

培养至适合的细胞成熟度

·原代神经元细胞培养(新生鼠/DMEMF12+FBS）

DMEMF12+FBS day1​

DMEMF12+FBS day3

DMEMF12+FBS day5​

DMEMF12+FBS day9​

DMEMF12+FBS day14

随着培养时间，神经细胞逐渐增加并且长出神经突起。

·原代神经元细胞培养(新生鼠/neurobasal+B27）

DMEMF12+FBS day1​

DMEMF12+FBS day9

DMEMF12+FBS day5

DMEMF12+FBS day12

DMEMF12+FBS day19

使用神经专用培养体系前期细胞需较多生长时间，但神经突起较长并复杂。在长时间培养后还是会有大量胶细胞增生。

·原代神经元细胞培养(胎鼠/DMEMF12+FBS）

DMEMF12+FBS day9​

DMEMF12+FBS day5

DMEMF12+FBS day1​

·更多原代神经元细胞培养

DMEMF12+FBS day8

DMEMF12+FBS day7

DMEMF12+FBS day6

DMEMF12+FBS day7

DMEMF12+FBS day14

DMEMF12+FBS day21

新生鼠使用常规培养系统在较短的培养时间內也能得到成熟的神经细胞。

·更多原代神经元细胞培养

fluo-4AM细胞內钙离子荧光染色

3D神经细胞轴突荧光染色

·文献参考

3D神经细胞轴突荧光染色

fluo-4AM细胞內钙离子荧光染色

Goshi et al. Journal of Neuroinflammation (2020) 17:155

Souto et al. Vet Res (2018) 49:86